DW行業解決方案|化妝品中(zhōng)微生物(wù)質(zhì)量控制檢驗

 

一．目的

用(yòng)于化妝品微生物(wù)指标（菌落總數、黴菌和酵母總數、耐熱大腸菌群、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌）檢測；

二．參照标準及微生物(wù)限量

本方案參照國(guó)家食品藥品監督管理(lǐ)總局批準頒布的《化妝品安(ān)全技(jì )術規範》2015版和2022版征求意見稿、SN/T 2098-2008 《食品和化妝品中(zhōng)的菌落計數檢測方法-螺旋平闆法》。

 

三．組成部分(fēn)

本方案提供化妝品微生物(wù)指标檢測所需儀器和培養基及其他(tā)試劑。

四．檢測流程及方案

流程解讀

1.樣品采集

2.樣品前處理(lǐ)

2.1液體(tǐ)樣品：用(yòng)吸管手動吸取或用(yòng)自動重量稀釋儀自動稱重稀釋，均質(zhì)器自動均質(zhì)後制成1:10檢樣。按需進行梯度稀釋。

2.2 油性液體(tǐ)樣品：10g樣品+5mL滅菌石蠟油混勻+10ML滅菌吐溫80

（40℃-44℃水浴振蕩10min）+75ML滅菌生理(lǐ)鹽水（40℃-44℃預溫），乳化後制成1:10的懸液。按需進行梯度稀釋。

2.3 膏、霜、乳劑半固體(tǐ)狀樣品

2.3.1  親水性樣品：10g樣品+ 90ML滅菌生理(lǐ)鹽水，均質(zhì) 1min—2min，靜止取上清，上清為(wèi)1:10勻液。按需進行梯度稀釋。

2.3.2  疏水性樣品： 10g樣品+ 10mL 滅菌液體(tǐ)石蠟 + 10mL 滅菌吐溫 80 + 70mL 滅菌生理(lǐ)鹽水，均質(zhì) 3min—5min，制成 1：10 檢液。按需進行梯度稀釋。

2.3.3  固體(tǐ)樣品：稱取 10g+90mL 滅菌生理(lǐ)鹽水，均質(zhì) 3min—5min，充分(fēn)均質(zhì)混勻，靜置後，取上清液作(zuò)為(wèi) 1：10 的檢液。

總結：化妝品根據與水分(fēn)子的親和性及性狀的不同，具(jù)有(yǒu)不同的類型，包括疏水性樣品和親水性樣品以及液體(tǐ)樣本和固體(tǐ)樣本，相關标準規定不同類型的樣品取10g/10mL經過不同的前處理(lǐ)，最終形成1:10的檢液。其中(zhōng)，親水性樣本一般選擇生理(lǐ)鹽水進行稀釋，而油性液體(tǐ)樣本或疏水性樣本稀釋液除生理(lǐ)鹽水以外，還需添加一定體(tǐ)積的非離子型表面活性劑（如tuwen80）與液體(tǐ)石蠟混合用(yòng)于樣品的乳化過程，從而使微生物(wù)更均勻的分(fēn)散，以便于其檢出。此過程一般可(kě)通過重量稀釋儀和均質(zhì)器實現。

3. 樣品接種

根據化妝品技(jì )術規範需要傾注法接種樣品，但此法對操作(zuò)人員的要求較高，而塗布法操作(zuò)難度低，可(kě)預先倒置相關微生物(wù)檢測的培養基平闆，用(yòng)自動細菌塗布儀塗布接種，上樣量可(kě)調至100微升。此外，根據SN/T 2098-2008 《食品和化妝品中(zhōng)的菌落計數檢測方法-螺旋平闆法》，化妝品中(zhōng)菌落計數還可(kě)選擇螺旋接種法。

4. 樣品培養

細菌用(yòng)恒溫培養箱培養，黴菌和酵母菌用(yòng)黴菌培養箱，培養條件根據微生物(wù)種類的不同而不同。

 

 

 

 

表2 不同微生物(wù)指标檢測培養條件

微生物(wù)種類/ 檢測指标	培養條件
	溫度	時間
菌落總數	36℃±1℃	48h±2h
耐熱大腸菌群	44.5℃±0.5℃/36℃±1℃	24h±2h/18h-24h
銅綠假單胞菌	36℃±1℃	18h—24h
金黃色葡萄球菌	36℃±1℃	24h±2h
黴菌和酵母菌	28℃±2℃	5d

 

5.樣品檢測

微生物(wù)定量檢測用(yòng)全自動菌落計數儀實現菌落計數，如樣品中(zhōng)菌落總數的測定、黴菌及酵母菌總數；微生物(wù)定性檢測用(yòng)自動微生物(wù)生化鑒定系統實現，如銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌的定性。

五．産(chǎn)品信息

 

表3 化妝品微生物(wù)指标檢測相關設備列表

序号	設備名(míng)稱	推薦型号	推薦品牌
1	重量稀釋儀	DW-JURAY	杭州大微
2	拍擊式均質(zhì)器	DW-4	杭州大微
3	微生物(wù)試劑自動分(fēn)裝(zhuāng)儀	DW-9	杭州大微
4	全自動微生物(wù)螺旋接種儀	DW-L2000	杭州大微
5	自動微生物(wù)塗布接種儀	DW-16	杭州大微
6	全自動革蘭氏染色儀	DW-GS100	杭州大微
7	細菌麥氏濁度儀	DW-MF30	杭州大微
8	自動微生物(wù)生化鑒定系統	DW-M80	杭州大微
9	全自動微生物(wù)菌落計數儀	DW-V9	杭州大微
10	恒溫培養箱	BPMJ-150F	上海力康
11	黴菌培養箱	BPH-9162	上海力康
12	水浴振蕩器	HTS-10	上海赫田

 

 

表4 化妝品微生物(wù)指标檢測相關培養基

 

序号	檢測指标	培養基名(míng)稱	規格及貨号	推薦品牌
1	細菌總數	TTC卵磷脂、吐溫 80 —營養瓊脂	250g/瓶, HB5189	青島海博
2	耐熱大腸菌群	雙倍乳糖膽鹽（含中(zhōng)和劑）	250g/瓶， HB8593	青島海博
3		伊紅美蘭（EMB）瓊脂	250g/瓶， HB0107	青島海博
4		胰蛋白胨水	250g/瓶， HB5218	青島海博
5	銅綠假單胞菌	SCDLP 液體(tǐ)培養基	250g/瓶	廣東環凱
6		十六烷基三甲基溴化铵培養基	9cm*10/包， HBPM5184	青島海博
7		營養瓊脂	250g/瓶， HB0109	青島海博
8	金黃色葡萄球菌	SCDLP 液體(tǐ)培養基（見上）或 7.5%氯化鈉肉湯	250g/瓶， HB4119	青島海博
9		Baird Parker 平闆	250g/瓶， HB4115	青島海博
10		亞碲酸鹽卵黃增菌液（Baird Parker 平闆添加劑）	5ml*10 ，HB4116-1	青島海博
11	黴菌及酵母	孟加拉紅瓊脂培養基	250g/瓶，HB0237-2	青島海博

 

表5 化妝品微生物(wù)指标檢測相關試劑

序号	試劑名(míng)稱	用(yòng)途	規格及貨号	推薦品牌
1	氯化鈉	樣品前處理(lǐ)稀釋	500g/瓶	國(guó)藥
2	吐溫80	樣品乳化劑	100ml/瓶，9005-65-6	biosharp
3	無菌液體(tǐ)石蠟	樣品前處理(lǐ)	1.7ml*20， GS070	青島海博
4	Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒	耐熱大腸靛基質(zhì)實驗	5ml*2/盒；HB8279	青島海博
5	革蘭氏染色液	細菌染色	500Ml/瓶，3瓶/套	杭州大微