今日施行！GB 4789.35-2023《食品微生物(wù)學(xué)檢驗 乳酸菌檢驗》标準解讀

2023年9月25日國(guó)家衛生健康委發布85項新(xīn)食品安(ān)全國(guó)家标準，其中(zhōng)微生物(wù)檢驗方法标準《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》（GB 4789.35-2023）将替代GB 4789.35-2016，于2024年3月6日起正式實施。

 

與GB 4789.35-2016相比，GB 4789.35-2023主要變化如下：

1. 修改乳酸菌的定義；
2. 修改設備和材料；
3. 修改培養基和試劑；
4. 修改樣品制備内容；
5. 修改培養條件；
6. 增加實時熒光PCR方法為(wèi)選做方法；

 

一、乳酸菌定義：

舊标準描述了乳酸菌是一類可(kě)發酵糖主要産(chǎn)生大量乳酸的細菌通稱，主要為(wèi)乳杆菌屬、雙歧杆菌屬和嗜熱鏈球菌。

新(xīn)标準增加了對乳酸菌生化現象的描述：不能(néng)液化明膠、不産(chǎn)生吲哚、革蘭氏陽性、無運動、無芽孢、觸酶陰性、硝酸還原酶陰性及細胞色素氧化酶陰性反應的細菌。

二、設備和材料：

1、增加樣品處理(lǐ)、培養所用(yòng)的設備和材料：厭氧培養裝(zhuāng)置（厭氧培養箱、厭氧罐、厭氧袋或能(néng)夠提供同等厭氧效果的裝(zhuāng)置）、渦旋混勻儀、恒溫水浴鍋或金屬浴；

2、增加實時熒光PCR法的設備和材料：實時定量PCR儀、離心機、微量移液器和滅菌吸頭、PCR管；

3、冰箱溫度範圍由 2℃~5℃ 改為(wèi) 2℃~8℃；

4、電(diàn)子天平感量由0.01g調整為(wèi)0.001g；

GB 4789.35-2016《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

GB 4789.35-2023《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

• 培養基和試劑

1. 新(xīn)标準用(yòng)稀釋液代替舊标準的生理(lǐ)鹽水。稀釋液主要成分(fēn)為(wèi)NaCl和胰蛋白胨；
2. 修改MRS瓊脂培養基和MC瓊脂培養基部分(fēn)成分(fēn)含量；
3. 增加實時熒光PCR法的試劑：DNA提取液、10×PCR緩沖液等。

GB 4789.35-2016《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

GB 4789.35-2023《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

四、樣品制備：

1、增加稀釋液預熱步驟：稀釋液在試驗前應在 36℃±1℃ 條件下充分(fēn)預熱15min~30min；

2、液體(tǐ)樣品處理(lǐ)步驟中(zhōng)，增加拍擊式均質(zhì)器拍打的操作(zuò)；

3、增加：經特殊技(jì )術（如包埋技(jì )術）處理(lǐ)的含乳酸菌食品樣品應在相應技(jì )術/工(gōng)藝要求下進行有(yǒu)效前處理(lǐ)。

GB 4789.35-2016《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

GB 4789.35-2023《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

五、培養條件：

1、新(xīn)标準要求傾注的培養基溫度在 48℃~50℃範圍，傾注的量在 15mL~20mL範圍。舊标準要求傾注的培養基溫度為(wèi)48℃，傾注的量為(wèi)15mL；

2、新(xīn)标準根據雙歧杆菌、嗜熱鏈球菌、乳杆菌的生長(cháng)特性，選擇36℃±1℃厭氧/需氧培養 48h，若菌落無生長(cháng)或生長(cháng)較小(xiǎo)可(kě)選擇延長(cháng)培養至72h。舊标準雙歧杆菌、嗜熱鏈球菌、乳杆菌統一選擇36℃±1℃厭氧/需氧培養72h±2h。

GB 4789.35-2016《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

GB 4789.35-2023《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

 

• 實時熒光PCR法：

舊标準乳酸菌的鑒定（可(kě)選做）隻有(yǒu)生化鑒定法，新(xīn)标準增加了實時熒光PCR法鑒定，可(kě)鑒定常見的幹酪乳杆菌、德(dé)氏乳杆菌保加利亞亞種、嗜酸乳杆菌、羅伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物(wù)乳杆菌和嗜熱鏈球菌，有(yǒu)較高的準确性和特異性，客戶可(kě)以根據需求選擇适宜的檢測方法。

GB 4789.35-2023《食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)檢驗乳酸菌檢驗》

 

針對标準修訂内容，杭州大微生物(wù)為(wèi)您提供專業化解決方案：

 

DW-JURAY系列 微生物(wù)樣品自動重量稀釋儀

 

該儀器可(kě)根據稀釋比例自動加入稀釋液，無需人為(wèi)計算，自動完成對任意重量樣品的準确稀釋，使工(gōng)作(zuò)簡易化；稀釋液經過可(kě)滅菌分(fēn)液管路，避免稀釋液污染和樣品污染。儀器可(kě)用(yòng)于乳酸菌檢驗中(zhōng)的樣本前處理(lǐ)自動稀釋。

 

産(chǎn)品優勢：

智能(néng)計算：無需人工(gōng)計算，可(kě)根據稀釋比例自動加入稀釋液，提高效率；

靈活運用(yòng)：儀器僅重6.5kg，支持在實驗室随時搬運；可(kě)通過觸摸面闆指令進行編程設置，定制稀釋程序，簡化儀器操作(zuò)；

可(kě)追溯性：實驗數據存于内置微處理(lǐ)器，可(kě)導出包括日期、時間、樣本重量、稀釋因子、稀釋液編号等在内的信息記錄；

無菌保證：稀釋液隻經過可(kě)滅菌分(fēn)液管路，避免稀釋液污染和樣品污染。具(jù)備可(kě)拆卸托盤，方便清洗。

 

DW-4系列 拍擊式均質(zhì)器

 

儀器是微生物(wù)實驗室進行“樣品勻液”制備的最佳工(gōng)具(jù)，可(kě)對固體(tǐ)、半固體(tǐ)、液體(tǐ)等樣品進行均質(zhì)處理(lǐ)，獨有(yǒu)的靜音設計可(kě)使您擺脫噪音困擾。

 

産(chǎn)品優勢：

界面友好：大屏幕液晶控制面闆，可(kě)實現快速操作(zuò)和簡易編程，為(wèi)不同的樣品設置不同的拍擊速度和均質(zhì)時間；

混合均勻：經驗證可(kě)有(yǒu)效混合樣品，使制備出的樣品勻液中(zhōng)微生物(wù)含量可(kě)充分(fēn)代表原始樣品的微生物(wù)含量水平，保障後續檢測；

無菌保證：配合專用(yòng)無菌均質(zhì)袋，樣品勻液可(kě)直接取樣分(fēn)析，無交叉污染。

 

DW-9系列 微生物(wù)試劑分(fēn)液器

 

儀器是一款精(jīng)密輸送液體(tǐ)的電(diàn)子蠕動泵分(fēn)液系統，專為(wèi)微生物(wù)實驗室各種試劑溶液（培養基、緩沖液、稀釋液等）的精(jīng)确計量和分(fēn)裝(zhuāng)而設計，1台設備即可(kě)實現“傾注平闆制備”和“試管分(fēn)裝(zhuāng)”等多(duō)種用(yòng)途，廣泛應用(yòng)于各種食品、藥品企業、政府檢測機構和科(kē)研單位的專業微生物(wù)實驗室。

 

産(chǎn)品優勢：

分(fēn)裝(zhuāng)快速：1L溶液分(fēn)裝(zhuāng)至100支試管中(zhōng)，最快僅需2分(fēn)鍾；

自動分(fēn)裝(zhuāng)：可(kě)按需編程單次分(fēn)裝(zhuāng)總量、分(fēn)裝(zhuāng)次數等信息，實現循環自動分(fēn)裝(zhuāng)；

選擇多(duō)樣：采用(yòng)防滴漏設計的分(fēn)液泵頭，配備不同直徑的分(fēn)液管，可(kě)分(fēn)裝(zhuāng)培養基、緩沖液和稀釋液等多(duō)種微生物(wù)試劑，保證精(jīng)确的分(fēn)液精(jīng)度；

無菌保證：采用(yòng)分(fēn)液管與分(fēn)液泵分(fēn)離的設計，使流體(tǐ)隻經過可(kě)滅菌的分(fēn)液管，杜絕污染可(kě)能(néng)。

 

DW-100A-K系列 智能(néng)厭氧微生物(wù)培養系統

 

該系統可(kě)為(wèi)各類厭氧/微需氧微生物(wù)（雙歧杆菌、産(chǎn)氣莢膜梭菌等）提供“最适所需”的氣體(tǐ)培養環境，微需氧最快2min，滿足食品安(ān)全、乳制品研究、益生菌制品等領域各種微生物(wù)培養需求；可(kě)應用(yòng)于益生菌活菌計數、耐氧菌馴化選育、不同氧環境平行條件探究等。

 

産(chǎn)品優勢：

一機多(duō)用(yòng)：厭氧、微需氧和嗜CO2培養；

快速生成環境：微需氧最快2min，厭氧最快4min；

罐體(tǐ)靈活配置：多(duō)種罐體(tǐ)可(kě)選，滿足不同培養需求；

QA質(zhì)控軟件：培養前5級質(zhì)控檢測，确保重現性100%。

 

DW-V系列 全自動菌落計數儀

 

儀器可(kě)自動對微生物(wù)菌落進行快速讀數和統計，提高統計效率，減少人為(wèi)誤差，還可(kě)實現對微生物(wù)平皿上所有(yǒu)菌落的高通量表型分(fēn)析，廣泛應用(yòng)于食品、乳制品、飲用(yòng)水、疾控中(zhōng)心等微生物(wù)實驗室。

 

産(chǎn)品優勢：

平闆選擇：支持傾注平闆、塗布平闆、膜濾平闆、3M測試片等多(duō)種平闆；

計數模式：8種自動計數模式，包括較大菌落、中(zhōng)型菌落、微小(xiǎo)菌落、灰白菌落、蔓延菌落、多(duō)色混雜菌、黴菌等；

數據安(ān)全：可(kě)設置不同級别操作(zuò)者的使用(yòng)權限、數據修改權限，符合HACCP、GLP、GMP等質(zhì)量體(tǐ)系管理(lǐ)要求；

軟件升級：具(jù)備偏差統計、全皿測量、雜質(zhì)剔除、網格清除、顔色分(fēn)類、人工(gōng)修正、排除污染、參數換算等。

 

DW-M80型 自動微生物(wù)生化鑒定系統

 

儀器通過生化反應原理(lǐ)捕獲細菌生化表型特征對微生物(wù)進行鑒定，可(kě)用(yòng)于GB 4789系列要求的食源性緻病菌的分(fēn)離鑒定和《國(guó)家食源性疾病監測工(gōng)作(zuò)手冊》要求的食源性緻病菌的耐藥分(fēn)析，可(kě)鑒定550種以上常見微生物(wù)，滿足乳制品中(zhōng)益生菌鑒定需求，廣泛運用(yòng)于食品安(ān)全、市場監督管理(lǐ)部門、疾控等微生物(wù)實驗室。

 

産(chǎn)品優勢：

數據庫龐大：包括菌種表型信息庫2000種以上，可(kě)鑒定食源性緻病菌和臨床緻病菌500種以上；

結果可(kě)靠：細菌生化鑒定一緻性95%以上；藥敏實驗結果符合率95%以上；

靈活運用(yòng)：配置智能(néng)化鑒定專家系統，自動識别異常細菌表型；一塊試劑闆可(kě)完成鑒定、藥敏雙試驗。

 

DW-MA6000型 實時熒光定量PCR儀

 

儀器基于多(duō)重熒光探針PCR檢測技(jì )術原理(lǐ)，可(kě)将待檢标本核酸與反應液混勻後直接分(fēn)裝(zhuāng)加樣到多(duō)重PCR反應闆條中(zhōng)，瞬間離心後即可(kě)上機檢測，一分(fēn)鍾加樣完成最多(duō)24種靶标基因檢測。

 

産(chǎn)品優勢：

溫控技(jì )術：六區(qū)獨立溫控技(jì )術，封閉式液體(tǐ)高效率熱傳導，輔助紅外伴随加熱和電(diàn)壓、電(diàn)流智能(néng)變頻系統，保證升降溫速快同時防止溫度過沖、無溫度邊緣效應和管内蒸發，使得實驗數據更可(kě)靠；

光學(xué)檢測：全球領先光學(xué)傳導和采集技(jì )術，利用(yòng)光纖将無衰減地将能(néng)量傳導至每一個反應孔和冷态CCD，從物(wù)理(lǐ)屬性上保證激發和檢測時的一緻性和真實性，大大提高靈敏度。

人機友好：實時監控，自動判别陰陽性結果，建立标準曲線(xiàn)，絕對/相對定量，多(duō)重定量，熔解曲線(xiàn)等。

 

檢測項目：

沙門氏菌、牙龈卟啉單胞菌、椰毒假單胞菌、緻瀉大腸埃希氏菌、小(xiǎo)腸結腸炎耶爾森氏菌、蠟樣芽胞杆菌、金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌、銅綠假單胞菌、單核細胞增生李斯特菌、阪崎腸杆菌、産(chǎn)氣莢膜梭菌