【目的】

牛奶（milk），是最古老的天然乳制品之一。因含有(yǒu)豐富的優質(zhì)蛋白和鈣，牛奶被中(zhōng)國(guó)膳食指南推薦為(wèi)每日營養來源。牛奶中(zhōng)微生物(wù)的含量是評價牛奶質(zhì)量的一個重要指标。如果乳品中(zhōng)微生物(wù)含量高，其中(zhōng)的緻病菌會導緻消費者中(zhōng)毒，為(wèi)預防和控制奶類中(zhōng)微生物(wù)污染，需對牛奶進行全流程、全方面的微生物(wù)檢驗檢測。

 

【牛奶分(fēn)類】

市場上在售牛奶主要包括四類：巴氏殺菌乳（鮮牛奶）、滅菌乳（純牛奶）、發酵乳（酸乳、風味酸乳）、調制乳。

 

巴氏殺菌乳

巴氏殺菌乳（鮮牛奶），是僅以生牛（羊）乳為(wèi)原料，經巴氏殺菌等工(gōng)序制得的液體(tǐ)産(chǎn)品。

 

滅菌乳

滅菌乳（純牛奶）分(fēn)為(wèi)超高溫滅菌乳和保持滅菌乳。

超高溫滅菌乳指以生牛乳為(wèi)原料，添加或不添加複原乳，在連續流動的狀态下，加熱到至少132℃并保持很(hěn)短時間（一般3-4秒(miǎo)）的滅菌，再經無菌灌裝(zhuāng)等工(gōng)序制成的液體(tǐ)産(chǎn)品。

保持滅菌乳指以生牛乳為(wèi)原料，添加或不添加複原乳，無論是否經過預熱處理(lǐ)，在灌裝(zhuāng)并密封之後經滅菌等工(gōng)序制成的液體(tǐ)産(chǎn)品。

 

發酵乳

發酵乳可(kě)分(fēn)為(wèi)酸乳及風味酸乳，指以生牛（羊）乳或乳粉為(wèi)原料，經殺菌、發酵後制成的 pH 值降低的産(chǎn)品。

 

調制乳

調制乳是以不低于80%的生牛（羊）乳或複原乳為(wèi)主要原料，添加其他(tā)原料或食品添加劑或營養強化劑，采用(yòng)适當的殺菌或滅菌等工(gōng)藝制成的液體(tǐ)産(chǎn)品。

 

【乳制品檢測标準】

不同種類的奶執行的國(guó)家标準不同，具(jù)體(tǐ)的檢測項目也有(yǒu)差異，但檢測項目的檢驗方法均參照GB 4789中(zhōng)的相關标準參照執行，如沙門氏菌的檢驗方法為(wèi)GB 4789.4，乳酸菌數的檢驗方法為(wèi)GB 4789.35。常見的檢測項目有(yǒu)沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸菌群等。

 

《GB 19645-2010 食品安(ān)全國(guó)家标準 巴氏殺菌乳》

 

《GB 25191-2010 食品安(ān)全國(guó)家标準 調制乳》

 

《GB 19302-2010 食品安(ān)全國(guó)家标準 發酵乳》

 

【牛奶中(zhōng)微生物(wù)檢測流程】

 

第一步：樣品稀釋

▶液體(tǐ)：取25ml樣品，置于225ml稀釋液中(zhōng)，制成樣品勻液。

▶固體(tǐ)/半固體(tǐ)：取25g樣品，置于225ml稀釋液中(zhōng)，用(yòng)拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min，制成樣品勻液。

 

适用(yòng)儀器1：DW-JURAY系列 微生物(wù)樣品自動重量稀釋儀

儀器用(yòng)于食品、藥品、化妝品等含微生物(wù)樣品的前處理(lǐ)自動稀釋，儀器可(kě)自動計算并完成對任意重量樣品的準确稀釋，使工(gōng)作(zuò)簡易化，提高效率。

 

産(chǎn)品優勢：

1、智能(néng)計算：樣品袋内樣品重量不确定，但儀器無需人工(gōng)計算即可(kě)根據稀釋比例自動加入稀釋液；

2、靈活運用(yòng)：儀器僅重6.5kg，支持在實驗室随時搬運；可(kě)通過觸摸面闆指令進行編程設置，定制稀釋程序，簡化儀器操作(zuò)；

3、可(kě)追溯性：實驗數據存于内置微處理(lǐ)器，可(kě)導出包括日期、時間、樣本重量、稀釋因子、稀釋液編号等在内的信息記錄；

4、無菌保證：稀釋液隻經過可(kě)滅菌分(fēn)液管路，避免稀釋液污染和樣品污染。具(jù)備可(kě)拆卸托盤，方便清洗。

 

适用(yòng)儀器2：DW-4型 拍擊式均質(zhì)器

儀器是微生物(wù)實驗室進行“樣品勻液”制備的最佳工(gōng)具(jù)，可(kě)對樣品進行均質(zhì)處理(lǐ)，獨有(yǒu)的靜音設計可(kě)使您擺脫噪音困擾。

 

産(chǎn)品優勢：

1、界面友好：大屏幕液晶控制面闆，可(kě)實現快速操作(zuò)和簡易編程，為(wèi)不同的樣品設置不同的拍擊速度和均質(zhì)時間；

2、混合均勻：經驗證可(kě)有(yǒu)效混合樣品，使制備出的樣品勻液中(zhōng)微生物(wù)含量可(kě)充分(fēn)代表原始樣品的微生物(wù)含量水平，保障後續檢測；

3、無菌保證：配合專用(yòng)無菌均質(zhì)袋，樣品勻液可(kě)直接取樣分(fēn)析，無交叉污染。

 

 第二步：梯度稀釋/增菌

▶梯度稀釋：取1ml 1:10樣品勻液注入9ml稀釋液中(zhōng)，制備1:100樣品勻液。重複操作(zuò)，制成遞增系列稀釋樣品勻液。

 

▶增菌：使用(yòng)适當培養基，對目标菌株進行增菌培養。

 

适用(yòng)儀器：DW-9系列 微生物(wù)試劑分(fēn)液器

儀器主要用(yòng)于微生物(wù)試劑分(fēn)裝(zhuāng)和培養基制備，能(néng)夠準确、快速地完成對試劑的自動分(fēn)裝(zhuāng)（1L溶液分(fēn)裝(zhuāng)至100支試管中(zhōng)僅需2分(fēn)鍾），廣泛運用(yòng)于各種食品、藥品企業和政府檢測機構的專業微生物(wù)實驗室。

 

産(chǎn)品優勢：

1、分(fēn)裝(zhuāng)快速：1L溶液分(fēn)裝(zhuāng)至100支試管中(zhōng)，最快僅需2分(fēn)鍾；

2、自動分(fēn)裝(zhuāng)：可(kě)按需編程單次分(fēn)裝(zhuāng)總量、分(fēn)裝(zhuāng)次數等信息，實現循環自動分(fēn)裝(zhuāng)；

3、選擇多(duō)樣：采用(yòng)防滴漏設計的分(fēn)液泵頭，配備不同直徑的分(fēn)液管，可(kě)分(fēn)裝(zhuāng)培養基、緩沖液和稀釋液等多(duō)種微生物(wù)試劑，保證精(jīng)确的分(fēn)液精(jīng)度；

4、無菌保證：采用(yòng)分(fēn)液管與分(fēn)液泵分(fēn)離的設計，使流體(tǐ)隻經過可(kě)滅菌的分(fēn)液管，杜絕污染可(kě)能(néng)。

 

第三步：培養

選擇适當的培養基，接種樣品勻液，設定合适的培養溫度及培養時間，進行培養。

 

适用(yòng)儀器：DW-100A-K系列 智能(néng)厭氧微生物(wù)培養系統

DW-100A-K系列智能(néng)厭氧微生物(wù)培養系統，廣泛服務(wù)于食品安(ān)全标準檢測所需的厭氧菌（如産(chǎn)氣莢膜梭菌、乳酸杆菌、雙歧杆菌）培養和微需氧菌（如空腸彎曲菌）培養；還可(kě)根據實驗需要選擇特定氧氣濃度（1%-15%可(kě)選）和CO₂濃度（5%-15%），開展厭氧菌最佳培養條件研究。可(kě)廣泛應用(yòng)于疾控、市場監督檢驗機構、科(kē)研實驗室、食品企業等各類檢驗場所。

 

第四步：菌落計數/菌種鑒定

▶菌落計數：選取菌落數在适宜範圍間、無蔓延生長(cháng)的平闆統計菌落總數，可(kě)用(yòng)肉眼觀察，必要時用(yòng)放大鏡或自動菌落計數器，記錄稀釋倍數和相應的菌落數量。

▶菌種鑒定：觀察菌種表型特征，結合生理(lǐ)生化實驗判斷菌屬，此過程可(kě)使用(yòng)生化鑒定試劑盒或全自動微生物(wù)生化鑒定系統。

 

适用(yòng)儀器1：DW-2系列 菌落計數器

DW-2系列菌落計數器為(wèi)數顯式半自動細菌檢驗儀器，由計數器、放大鏡、專用(yòng)探筆(bǐ)和計數池等部件組成，是杭州大微專為(wèi)“經典培養法”微生物(wù)實驗中(zhōng)的“菌落計數”環節而設計制造的最新(xīn)一代産(chǎn)品。DW-2A型除主機自帶計數筆(bǐ)外，另外加配1支可(kě)移動、可(kě)單獨計數的數顯半自動菌落計數筆(bǐ)，實現“一機兩用(yòng)”。該産(chǎn)品廣泛用(yòng)于食品安(ān)全、飲料、藥品、生物(wù)制品、衛生用(yòng)品、飲用(yòng)水、工(gōng)業廢水的細菌數檢驗，為(wèi)各類微生物(wù)實驗室“菌落計數”所必備之基礎儀器。

 

适用(yòng)儀器2：DW-V型 全自動菌落計數儀

DW-V系列全自動菌落計數儀用(yòng)于對微生物(wù)的菌落進行快速讀數和統計，能(néng)快速提高統計效率，減少人為(wèi)誤差，廣泛應用(yòng)于高校科(kē)研單位、疾控中(zhōng)心、質(zhì)檢系統、商(shāng)檢系統、藥品檢驗機構、環境監測部門、自來水公(gōng)司，以及食品、藥品、乳品企業等，是現代微生物(wù)檢測實驗室先進和高效的全自動菌落計數器。

 

适用(yòng)儀器3：DW-M80型 自動微生物(wù)生化鑒定系統

DW-M80型自動微生物(wù)生化鑒定系統通過生化反應原理(lǐ)（包括酶底物(wù)反應/糖利用(yòng)反應/同化反應/氨基酸實驗等）捕獲細菌的生化表型特征，對微生物(wù)進行鑒定。系統可(kě)用(yòng)于食品安(ān)全微生物(wù)檢驗國(guó)家标準GB4789系列所要求的食源性緻病菌分(fēn)離鑒定；可(kě)用(yòng)于《國(guó)家食源性疾病監測工(gōng)作(zuò)手冊》所要求的食源性緻病菌耐藥性分(fēn)析。廣泛應用(yòng)于市場監督管理(lǐ)部門、海關出入境檢驗檢疫、疾病預防控制、食品安(ān)全、制藥、獸醫(yī)、漁業水産(chǎn)養殖等微生物(wù)實驗室。

 

【乳酸菌活菌計數】

目前，我國(guó)關于活性益生菌産(chǎn)品中(zhōng)活菌計數主要是參考《GB 4789.35 食品安(ān)全國(guó)家标準 食品微生物(wù)學(xué)檢驗 乳酸菌檢驗》執行，主要涉及了3種乳酸菌，分(fēn)别為(wèi)乳杆菌屬、雙歧杆菌屬和嗜熱鏈球菌屬。

該标準采用(yòng)了培養法來檢測食品中(zhōng)的活菌數。其中(zhōng)6.2.3.2是厭氧培養，對雙歧杆菌進行計數；6.2.3.3是需氧培養，對嗜熱鏈球菌進行計數；6.2.3.4是厭氧培養，對乳杆菌（或乳杆菌與雙歧杆菌）進行計數。

 

【快速檢測】

在傳統檢測流程之外，快速檢測法也因快速、高效等優勢進入大衆視野，為(wèi)人熟知的有(yǒu)酶聯免疫吸附法、PCR法、ATP生物(wù)熒光法等。

杭州大微通過将ATP熒光原理(lǐ)與微生物(wù)特性相結合，開發了DW-ES800型微生物(wù)實時檢測系統。

 

适用(yòng)儀器1：DW-ES800型 微生物(wù)實時檢測系統

DW-ES800型微生物(wù)實時檢測系統是新(xīn)一代的可(kě)在食品等固體(tǐ)或飲用(yòng)水等液體(tǐ)樣本中(zhōng)快速定量檢測微生物(wù)的快速衛生監控系統。該款創新(xīn)型的系統分(fēn)為(wèi)酶-底物(wù)反應法培養模塊和實時光電(diàn)檢測模塊兩個部分(fēn)；培養模塊實現30個微生物(wù)檢測拭子的自動培養，光電(diàn)檢測模塊采用(yòng)了高靈敏度的光電(diàn)二極管技(jì )術和簡潔易用(yòng)的操作(zuò)設計，是一款靈敏、精(jīng)确、價格合理(lǐ)的微生物(wù)快速檢測系統。儀器可(kě)用(yòng)于食品、化妝品、餐飲企業等行業中(zhōng)總大腸菌群、糞大腸菌群、大腸杆菌、細菌總數等指标的快速檢測。

 

适用(yòng)儀器2：DW-BT100型 快速微生物(wù)定量檢測系統

DW-BT100快速微生物(wù)定量檢測系統是近10年來問世的最先進的微生物(wù)快速自動化定量檢測技(jì )術。該系統以傳統微生物(wù)培養理(lǐ)論為(wèi)基礎，将染色、新(xīn)光源和光子探測技(jì )術、二氧化碳傳感技(jì )術結合在一起，通過雙溫光電(diàn)檢測系統和計算機控制的模塊化分(fēn)析系統來監控微生物(wù)生長(cháng)代謝(xiè)所引發的光密度和顔色的變化。該技(jì )術的基礎是：當目标微生物(wù)在特異性的檢測管中(zhōng)生長(cháng)，代謝(xiè)産(chǎn)物(wù)二氧化碳引起檢測管 中(zhōng)感光試劑的光譜模式和化學(xué)特性發生變化。DW-BT100系統簡化了傳統微生物(wù)的檢測方法，也使檢測時間得以明顯縮短。檢測結果可(kě)以自動通過網絡實時傳遞到需要檢測信息的部門。DW-BT100系統是在一台獨立的儀器上可(kě)以進行多(duō)種微生物(wù)檢測的系統。該技(jì )術目前已被用(yòng)于原奶、乳制品、食品保健品、化妝品、的微生物(wù)檢測以及水廠、政府監管部門、科(kē)研院所。

下載應用(yòng)文(wén)獻